副溶血弧菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)

产品名称：副溶血弧菌核酸快速检線關测试剂盒
英文名称：Rapid Detection kit for Vibrio 新大parahaemolyticus

产品编号与包装规格：

产品简介：本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术（Loop-mediat體跳ed isothermal amplification技離，LAMP），用于食品中副溶血弧菌的快速检测，可借助显色指示剂直接判读结果就書。

检测原理：利用兩(liǎng)對(duì)特殊引物和具有链置换見在活性的Bst DNA聚合酶，使模板習嗎兩(liǎng)端引物结合处循环出现环状单链结電道构，引物顺利与模板结合并進(j民舊ìn)行链置换扩增反应，实现在恒温条件下（60-65℃）進(j跳我ìn)行连续快速扩增。反应加入显色指示剂，阴阳性结果显色差异显著，可就章直接通過(guò)颜色变化判读结果。

产品特点：
  &nbs北司p;   1.外市 快速简便：將(jiāng)酶、引物等反应组分混匀後(hòu)進動路(jìn)行干粉化处理，增加试剂稳定冷區性，使用時(shí)减少溶液配制步骤河一，更为便捷，整个检测反应可在1 h内完成(chéng)兒關；
    &nbs黃自p; 2. 特异性高店志：利用靶基因序列上的多个独立区域设计多条引物，保证扩增反应的高科習度特异性；
     &nbs通亮p;3. 灵敏度高：最-低检验限达到(dào)舊看4 CFU/Test；
    光短;  4. 判读简单：反应前加入显色指示剂，反应後(兒拿hòu)通過(guò)肉眼观察反应液颜色变化關器或者經(jīng)荧光监测仪器跟踪拿吃荧光图谱的变化判读结果，直观方便，且河草可有效避免反应後(hòu)開(kāi)盖造成(chéng)的气溶胶污染。吃女

副溶血弧菌核酸快速检测试剂盒产品组分：

储存条件与保质期：2~8℃条件下储存，有效期为12火對个月。

适用仪器：
      1近了. PCR仪器或金属浴恒温器，如果检测樣(yàng)品为D但男NA樣(yàng)品，水浴锅即可。
   是在   2. 高速离心机，樣窗熱(yàng)品的前处理需要用高暗放速离心机做分离。

樣(yàng)品富集：
      1船件. 樣(yàng)品前处理：取25 g待检樣(yàng)品置于22哥術5 mL 3%氯化钠碱性蛋白胨水中，前增菌10-12 h，對(d子司uì)增菌液中的菌体富集用于LAMP快速检测。
  &nbs熱很p;   2. 适用樣(yàng)品类型：增菌區商液或者可疑菌落樣(yàng)品。
      美資3. 待测樣(yàng)品存放：粗提的待检裡畫DNA樣(yàng)品保存于-4~0時音℃，不应该超過(guò)24 h；利睡自用试剂盒提取的DNA樣(yàng)品可在-20℃長(cháng)期保存，但应雪店避免反复冻融。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒操作流程

副溶血弧菌核酸快速检测试剂盒使用指南：

1，樣(yàng)品前处理

   懂我A. 樣(yàng)品增菌液模板DNA的制备：
      &信購nbsp;  船視;a) 吸增菌液1 mL到(dào)1.5 mL规格的无菌离木資心管中，6000 r/min离心5 min，弃上清，50 μL无菌超纯業跳水悬浮洗涤沉淀1-2次，6000 r/min离心5 mi司說n，完-全去除上清；
    &nbs少見p;   什做; b) 加入30 μL裂解液，充分悬鐵笑浮菌体，轻弹管壁消除气泡，99℃加热10 min；
     報城    c子愛) 12000 r/min离心15 min，也什上清即为粗提的DNA，可转移至0.2 mL无菌离吃在心管中，在-20℃下可長(cháng)期保存。

   B. 可疑菌落模板 DNA 的制明房备：挑取可疑菌落，悬浮到(dào)含30 μL裂解液的无菌离心管中，後(hòu又資)按照上述步骤b)、c)操作。

2，阴、阳性對(duì)照和干粉试剂复溶

   A. 阴、阳性對(duì)照复溶：開為首-次使用時(shí)，加入80 μL超纯水至阳性對關些(duì)照和阴性對(duì)照木的冻干粉中，待溶解後(hòu)混匀，-20℃存储待用。
   B. 干粉试剂复溶弟制：取出冻干粉试剂，按照需求剪取n个检测试剂管（n=待检测樣(yàn街麗g)品数+1管阳性對(duì)照+1管阴性對(duì)照），飛業每管加入20 μL复溶液，完-少城全溶解後(hòu)待用。

3，扩增反应
   A. 打開(kā廠到i)能(néng)够提供恒温条件的仪器，设置到(dào)64℃待林自用；
   B. 看大向(xiàng)上述已加入复溶液的n个反应管中各加入显色指示剂2.5 視技μL；
   C. 費西向(xiàng)上述已加入复溶液的n个反应管中分别加入待测樣(那藍yàng)品核酸、阴性對(duì)照、阳性對(duì相山)照各2.5 μL，盖紧盖子；都為
   D. 將(j聽地iāng)所有的反应管置于恒温仪器中，恒温64℃反应50 空店min。

4，结果判读：反应结束後(hòu)，建议在自然光线充足的环境条件下，將(jiāng)樣(yà飛跳ng)品置于白色背景下观察结果，阴性對(duì)場電照检测试剂管呈淡橙色，阳性對(duì)照检测试剂管呈荧光習問绿，待测樣(yàng)品反应管以此作吃她为對(duì)照進(jìn)行判读，若阴阳對(duì)照反应管任一结果与上科亮述情况不符，则本次检测结果无效，应重新检测或与個和产品技术支持联系。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒灵敏度對(duì)短舞比

副溶血弧菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于食品中副溶血弧菌的快速检测。

副溶血弧菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于食品中副溶血弧菌的快速检测。