【环凯原创】有趣的细菌拉丝试验 — 快速区分革兰氏阳性菌和湖信阴性菌

是否有想知道(dào)平板上的紙區分离菌的到(dào)底是革兰氏阴性還(hái)會老是阳性菌，却因沒(méi)有革兰氏染色或沒(méi)有显微镜或不會(慢醫huì)革兰氏染色操作而不知所措？或者，革兰氏做舊染色後(hòu)還(hái)不中些确定标本测试菌是革兰氏阴性還(hái)是阳性菌的讀山？

下面(miàn)给大家介绍个简单又有趣的解决方法 綠市—— 细菌拉丝试验，不需染色剂不需显微镜廠長，一分钟轻松区分革兰氏阳性菌和阴性菌。

此法在1970年Smith^【1】首先报道(dào)应用去氧胆酸钠溶液做拉丝试验区分弧菌与非要可弧菌（如气单胞菌属细菌），初步鉴别霍乱弧菌；1981年Shushan等^【2】和1983年Agbonlahor等^【3】相继应用氢氧化钾溶液做拉丝试验区分革兰氏阳性菌和阴性菌。

目前國(guó)内细菌拉丝试验主要也是校到应用于兩(liǎng)个方面(miàn)：一是用于霍乱弧海事菌初步鉴别^【4】，二是用于区分革兰氏阳性菌和阴性菌^【5-8】。

区分革兰氏阳性菌和阴性菌的拉丝试验方法^【6】：取一张洗净玻片， 滴加25g/L氢氧化钾水溶液一滴，根据菌落大小，从平板上挑取科分单个菌落或数个纯培养菌落，置于氢氧化钾滴液中研磨，經(jīng)15-60但街秒， 自混悬液中轻轻提起(qǐ)接種(zhǒng)环，仔细观察；60秒你土内混悬物中形成(chéng)黏液状并可拉成(ché木明ng)细丝（5mm以上）为阳性（對(duì)应是革兰氏阴性菌），60秒混悬物白花均匀不出现细丝者为阴性（對(du那議ì)应是革兰氏阳性菌）。

目前有兩(liǎng)種(zhǒng)說(sh姐些uō)法，第一種(zhǒng)說(shuō)法是革兰氏得小阴性菌的细胞壁在稀碱氢氧化钾溶液中容易頻媽裂解，裂解後(hòu)释放出DNA，使氢氧化钾溶液变为粘稠并形成(公學chéng)粘丝，反之，稀氢氧化钾對(duì)此革兰氏阳性菌无此作用^【5】；第二種(zhǒng)說(shuō)法是与報就细胞壁化學(xué)结构有关，在氢氧化钾作用下革兰氏阴性菌的细胞壁黑從中所含的脂多糖、脂蛋白及脂质被(bèi)皂化而形成(子我chéng)粘稠物，致拉丝试验阳性，而革兰氏阳性菌東科细胞壁主要成(chéng)分是粘肽，氢氧化钾不能(néng)使其上畫形成(chéng)粘稠物，故拉丝试验阴性。革兰氏阴性經(jīng)過(從劇guò)氢氧化钾溶液处理後(hòu)再革兰氏染銀農色镜检，發(fā)现菌体细胞壁溶解，呈模化也糊絮片状，细胞壁有不同程度的损伤，接種(zhǒng)适宜培养基上不能(nén微遠g)生長(cháng)繁殖，而革兰氏阳性菌无此现象^【6-7】。

其实，這(zhè)兩(liǎng)種(飛紅zhǒng)說(shuō)法都(dōu)是认为与革兰氏阳性和阴性菌细胞壁结舞要构成(chéng)分有关，所以此法懂頻可用于区分革兰氏阳性和阴性菌。但至于粘稠的物质是DNA還(hái)子數是革兰氏阴性菌细胞壁类脂物质被(bèi)氢氧化钾皂個姐化形成(chéng)的，要阐明還(hái)木服有待進(jìn)一步的研究。

拉丝试验区分革兰氏阳性菌和阴性菌的准确性：相关研究报道(dào)表明^【6-8】，氢氧化钾拉丝试验结果与革兰氏染色一致，二者符合率为100%。拉丝试验低技不但能(néng)正确区别革兰微南氏阴性菌和阳性菌，還(hái)有助于复核革兰氏染色结果的正确性，也是革能多兰氏染色质控的有力措施。

但拉丝试验结果也會(huì)受到男習(dào)试剂、菌量、菌型等因素到工影响^【6】，所以为了保证该试验结果的准确，操作時(shí)需注意：