脉冲式均质器在食品微生物快速检测中应用研究

        &輛房nbsp;脉冲式均质器在食品微生物快速检测中应用研究

   随著(zhe)經(jīng)济的發(區睡fā)展，人民對(duì)食品近醫安全性的要求也日益提高，如何更快更好(hǎo)的检测出食品能(作不néng)否放心食用就(jiù)显得尤为重要。微生黃服物指标是食品检测中一个重要的指标，而传统的检测方法操作讀暗准备繁琐且樣(yàng)品前处我門理带有一定的缺陷和局限性。为了提高检测紅木效率，微生物检测可使用快速检测方法。现行上常用兵不的快速检测方法为使用快速测试片。由于测试片上含有冷水可溶性凝胶，因又門此无需传统方法中倾倒琼脂的步骤，从而避免了對(duì)细菌可能(n市電éng)造成(chéng)的热损伤。相對(du微林ì)于传统平板检测方法操作简便、结果稳定，具有良好(hǎo)的实用性能畫煙(néng)，可大大简化操作程序，提高检测速度[1]。为了快速检测方相金法能(néng)更好(hǎo)的開(kā路但i)展，选择适宜的樣(yàng)品前处理的均质方式可使检测数据更對都真实可靠。本文通過(guò)研究新式的脉冲式均质器与传统的拍打式、腦生旋转搅拌式在使用效果上的差异，以得出使用脉冲式均质小說器在食品微生物快速检测中更优的劇地结论。

  一.材料

（1） 试验材料

  美國(guó)3M公司细為媽菌总数测试片，美國(guó)3M公司酵母菌/霉菌测试片，检测從姐樣(yàng)品来源于市场随机购买友器。

（2） 主要培养基

平板计数琼脂培养基、孟加拉红培养基、對物伊红美蓝琼脂、Baird-Par弟兵ker 琼脂基础、亚硫酸铋（藍間BS）琼脂。以上培养基均由广东环凯微影坐生物科技有限公司提供。

（3） 主要仪器设备

ShockMixer-1 脉冲式樣(訊綠yàng)品前处理器（环凯制造）、拍打式均质舊見器、搅拌式均质器、振荡器、高压蒸气灭菌锅、超净工作台、电子天平、移液枪、生化培笑黃养箱。

（4） 菌株

大 肠 埃&n看劇bsp;希 菌 [CM老紅CC（B）44102] 、金黄色葡萄球菌木歌[CMCC26003]、福氏志贺氏菌[C麗兵MCC（B）51572]、乙型副伤寒沙门氏菌雪件[CMCC51572]。以上菌種(zhǒng)均由广东环凯微生物微讀科技有限公司提供。

（5） 脉冲式均质器的工作原理

通過(guò)高频率震动内装食品樣(yàn窗女g)品的胶袋，产生强烈冲击波与高速搅动联合作用，將(jiā那路ng)食品中的微生物驱赶到(dào)樣(yàng)品悬液中，形成(ch服冷éng)菌浓度均匀的樣(yàng)品稀释液。减轻了對(duì)樣(車一yàng)品的破坏，从而极大地减少了樣(yàng)品碎片的产生。食品雨光樣(yàng)液澄清度高，能(néng)与快速路視检测方法更配套。

 二.试验方法

1.平板法

   脉冲式均质器的操作多村步骤为，取一无菌袋打開(kāi)置于天平上称取25 g樣(笑微yàng)品，倒入所需225&nbs筆草p;mL无菌生理盐水，置于脉冲均质器的振荡环中，脉冲時(shí)是什间设30 s，运行均质。再分機新别依照GB/T4789.2-2010&志還nbsp;， GB47但可89.4-2010 ， GB/T4789.10-201知體0 ，GB/T4789.15-2010，行謝GB/T4789.5-2003進(jìn)行。

2.快速测试法

22.1 细菌总数快速测试片答關法

（1）利用脉冲均质器把樣(yàng)品制成(chéng)好雨1∶10的樣(yàng)品匀液，按樣(yàng)品的特性放討再進(jìn)一步稀释为1∶100，1∶10話兒00等浓度的供试液。

（2）在平坦的实验台表面(mi老光àn)解開(kāi)测试片的上层膜，用移液枪吸取1 日了;mL樣(yàng)品供试液，垂直滴加明老在测试片的中央。把上层膜盖下或木遠直接落下，但不可滚动上层膜。使用压板隆起(qǐ)面(mià工開n)底朝下，放置在上层膜中央，轻轻地压下，使樣子雜(yàng)液均匀覆盖于圆形的培养面(miàn)积上，切勿扭转压金服板。拿起(qǐ)压板，静置至少1 min以使培养基凝固。每冷女个

樣(yàng)品做2个平行试验。

（3）测试片的透明面(miàn)朝劇下上，可堆叠至20片，水平置于培养箱内

36±1 ℃培养48±2&n小歌bsp;h。

2.2.2 酵母菌霉黃件菌快速测试片法

（1）樣(yàng)品前处理同2.2.1（1）。

（2）测试片使用方法同2.2.1（2）。

（3）將(jiāng)测试片的透明面姐說(miàn)朝上，水平置于培养箱内21~25 ℃培养3~熱女5 d。

3 结果与讨论

3.1 脉冲式均质器對(duì)微生物的杀灭影响用现行國(guó呢通)标平板计数法分别检测大肠埃希菌、金黄色白新葡萄球菌、福氏志贺氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌的菌悬液。把各一定浓度的菌悬我自液分别以15 s、30 廠你s、60 s、180 s 林鐵;的脉冲時(shí)间处理，检测脉冲土她波处理是否會(huì)對(duì)微生物生存鐵光造成(chéng)不利影响，结果见表1。由实验结果可见脉冲处理不影响大肠埃希間女菌、金黄色葡萄球菌、福氏志贺氏菌、乙型副伤寒但明沙门氏菌的生存，不對(duì)其构成能動(chéng)杀灭作用。

表1 脉冲前处理對(duì)工購标准菌株生存的影响

3.2 比较试验

對(duì)市场上随机购买的5个樣(yàng)品分别采用現快脉冲式均质器、拍打式均质器与旋转搅拌式均质器進(jì光計n)行前处理後(hòu)利用微生物快速测试片，可算對(duì)检品的菌落总数和霉菌進(jìn)樂師行快检。同時(shí)用脉冲法前处理後女用(hòu)的樣(yàng)液做國(g低路uó)标的平板法，结果见表2。从表中可看出脉冲式前处理後(hòu)，使用快速测風房试纸片法测菌落总数与霉菌的结果，与用脉冲式

前处理後(hòu)用传统的國(g家家uó)标平板法得出的数据相同，說(shuō)明使用食品快速测试纸片测訊玩定菌落总数与霉菌的结果是可信的。而對(duì)比脉冲式、拍打式和旋機很转搅拌式前处理的数据，可說(shuō)明脉冲式的均质效果更好(hǎo)綠兵，检测数据更接近实际菌数。

4 结论

在市面(miàn)上流通的食品，大部分都(dōu)属于快速消费品，因此做舞提高此类快消品的微生物检测速度和准确度，對(讀暗duì)有效的保证食用人群的身体健康具有重要的意义。在微生錯工物快速检测中，采用快速测试片是常用的方法。此森窗方法具有显著的优点：

*:减少培养基配制工作，可及時(shí)检测，缩短准备時(shí)间。

第二:在取樣(yàng)時(shí)同時很吃(shí)接種(zhǒng)，结果更能(nén匠一g)反映当時(shí)樣(yàng)本中真实的细菌数。

第三:不需要大量的玻璃器皿，操作简便；易于保存，便于运输，工作量小。吧妹

避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的懂看缺陷。在食品的微生物快速检测中，樣(yàng)品前处理的好海放(hǎo)坏會(huì)影响快速检测的准黑資确度。现時(shí)上比较新式的方法是使用脉冲式均质照路器。這(zhè)種(zhǒng)方法优于目前國(guó)内普遍使用男白的拍打式和旋转搅拌式均质器。脉冲式前处理對(duì)食品中微生物无杀灭作用那國，通過(guò)与國(guó)标方法對(duì)比，证实检测效果良好(hǎ男光o)，可以应用于微生物快速检验工作中。脉冲式均花個质器的优点有：

*，减少食品碎片的产生，zui大限空科度地减少對(duì)一些快速检验場光方法的干扰因素。

第二，无需打碎樣(yàng)品花習，不會(huì)导致樣(yàng)品处理袋的破裂。

第三，樣(yàng)品碎片较少，樣(yàng)品暗訊液澄清，易于取樣(yàng)，易于過(guò)滤，节省時(shí)间。

第四，的樣(yàng)品处理方法微見但生物的释放效果等同甚至优于其他方法。世界上已有一些國(gu讀見ó)家或组织批准了這(zhè)種(zhǒng)方法，如标准化组织在《ISO72朋師18：2007食品与饲料中微生物微生物學(xué)检验总的要求与指靜行导》第三版5.4中，把脉冲均质法列为三種(zhǒng)仪器樣(yàng)品拿國均质前处理方法之一[2]。因此，在微生物快速检测中，使用脉冲式均质業短器均质可提高工作效率和减少检测的干靜鄉扰性，应大力推广应用于食品微生物快速检测前处理中。