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产品名称:Bst DNA Polymeras嗎請e, Large Fragment(with dNTP)
中文名称:Bst DNA聚合酶,大片段(wit分電h dNTP)
产品编号与包装规格:
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
HKE015-01A | Bst DNA Polymer章都ase, Large Fragment(with dNTP)劇業 | 800U | Bst DNA聚合酶,大片段 |
产品描述:Bst DNA聚合酶大片段是Bacillus ste店唱arothermophilus 請為DNA聚合酶的一部分,来源于E.coli菌株。利用基因重组技术,在大肠杆匠請菌中進(jìn)行表达後(hòu)經(jīng)多次纯化分离而得。该酶具有5′哥樹→3′DNA聚合酶活性, 但不我討具有5′→3′外切核酸酶活性。本制品可应用于DNA测朋著序、DNA 标记和等温DNA扩增等。
产品特点:
链地海置换活性强。
&nb也知sp; 草視高灵敏度。
&nb山姐sp;樶佳活性温度为 65℃,恒温扩增,无需热做亮循环仪。
产品用途:
&nbs河師p; 1)富子下含 GC 序列的 DNA 序列测定;
 時數;2)微量(纳克量)DNA 模板的快速测序;
&nb花西sp;3)随机引物 DNA 标记;快麗
 要著; 4)双線麗链 DNA 5'突出端补平法标记;
&nbs說知p; 5)可用于等温 DNA 扩增,如环介少得导等温扩增(LAMP),全基因组扩增(WGA的水),解旋酶恒温基因扩增(HDA)等。
应用实例:图例)Bst DNA 聚合酶大片段用于LAMP 实验,以 M13 ssDN妹媽A 为模板, 以 F3/B3,FIP/BIP 为引物,65℃反应1離土 小時(shí)後(hòu),進(jìn)行琼計唱脂糖凝胶电泳检测。
泳道(dào)M:1kb DNA Ladder ;
泳道(dào) 1:LAMP 扩增产物。
反应体系(25μL)如下:
10×Bst LF Buffer | 2.5μL |
F3/B3 | 0.2μM(终浓度) |
FIP/BIP | 0.8μM(终浓度) |
甜菜碱 | 1M(终浓度) |
dNTPs | 400μM(终浓度) |
M13 ssDNA 模板 | 2μL |
Bst DNA 聚合酶Large Fr高請agment | 1μL(8U) |
ddH2O | 至 25μL |
保存温度:-20℃。
产品包装(A 包装):
质量保证:經(jīng)多次柱纯化,SDS-PAGE 胶检裡公测仅可见清晰单一的目的条带,qPCR 方法检测无大肠杆菌 DNA 残留,无核妹看酸内、外切酶污染。
活性定义:65℃条件下,30分钟内使10nmol的dNTP媽街s掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性雨如单位。
10×反应缓冲夜:200mM Tris-HCl,100m錯喝M (NH4)2SO4,500mM KCl,20mM MgSO4,1% 外鐘Tween 20,pH8.8。
保存体系:50 mM KCl,10 mM Tris-HCl (pH 7.5),1mM鄉錯 DTT, 0.1 mM EDTA,0.1% Tri相機ton X-100 和 50%月兵 Gly1cerol。
反应条件:1×反应缓冲夜,65℃温浴。
热失活:80℃,10 分钟。
注意事(shì)项:
&nbs習費p; 1)Bst DNA 聚合酶不劇一具有 3′→5′外切酶活性;
劇事 2)長(ch月理áng)期贮存需加入 100μg/mL BSA 或 下海0.1% Triton X-100;
&體志nbsp; 3)建议反畫做应温度不要超過(guò) 70℃;
&n民裡bsp;4)Bst DNA 聚合酶不能(néng樹道)用于热循环测序或PCR。