粪链球菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光照匠法)

产品名称：粪链球菌核酸快速检测试剂盒
英文名称：Rapid Detection ki房說t for Streptococcus f市章aecalis

产品编号与包装规格：

产品简介：本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术（Loop-med北雪iated isothermal amplification，LAM妹服P），用于包装饮用水等水体中粪链球菌的快速检测，并借內影助显色指示剂直接判读结果。

检测原理：利用兩(liǎng)對(duì)子街特殊引物和具有链置换活性的Bst D從刀NA聚合酶，使模板兩(liǎng)端引物结合处循环出冷問现环状单链结构，引物顺利与模板结合并進(j的報ìn)行链置换扩增反应，实现在恒温条件下（60-65的話℃）進(jìn)行连续快速扩增。反应加入显色指示剂，阴阳性家大结果显色差异显著，可直接通過(技來guò)颜色变化判读结果。

产品特点：
  &nb理們sp;  &nbs動銀p;1. 快速简便：將(jiāng)酶、引物等反应组分混匀後(hòu)進(j中做ìn)行干粉化处理，增加试剂稳請訊定性，使用時(shí)减少溶液配制步骤，更为便人也捷，整个检测反应可在1 h内完成(chéng)；
     那可; 2. 特异性高：利用靶基因序列上的多黃綠个独立区域设计多条引物，保证扩增反应的高度特异性；
     &nb大房sp;3. 灵敏度高：最-低检验限达到(工麗dào)9 CFU/Test；
   鐵區   4. 判读简单：反应前加入显色指姐理示剂，反应後(hòu)通過(guò)肉眼观察反应液紅快颜色变化或者經(jīng)荧光监测仪器跟踪荧光图谱的討下变化判读结果，直观方便，且可有效避免反应後(hòu)開(kāi)盖造成(北自chéng)的气溶胶污染。

粪链球菌核酸快速检测试剂盒产品组分：

储存条件与保质期：2~8℃条件下储存，有效期为12个月。

适用仪器：
  &nb畫笑sp;   1. PC資我R仪器或金属浴恒温器，如果检测樣(yàng)品为DNA化場樣(yàng)品，水浴锅即可。
   &務校nbsp;  2. 高速离心机，樣(yàng)品的前处理需可農要用高速离心机做分离。

樣(yàng)品富集：
   海吧   低北;1. 樣(yàng)品前处理：取250 mL待检水樣(yàng)進(區草jìn)行抽滤，滤膜置于100ml叠氮化物葡萄糖液态培养基進(美討jìn)行前增菌8-12 h，對(duì)增菌液中的菌体富集用于LAMP銀照快速检测。
    &nbs月在p; 2. 适用樣(yàng)品类型：增菌液或者得窗可疑菌落樣(yàng)品。
   &從讀nbsp;  3. 待测樣(yàng)說亮品存放：粗提的待检DNA樣(yàng)品保存于-4~0℃，飛熱不应该超過(guò)24 h；利用试剂盒提取快作的DNA樣(yàng)品可在-20℃長(cháng)期保存，但应避技村免反复冻融。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒操作流程

粪链球菌核酸快速检测试剂盒使用指南：

1，樣(yàng)品前处理

   A金女. 樣(yàng)品增菌液模板D行日NA的制备：
    &nbs少坐p;    a) 吸增小公菌液1 mL到(dào)1.5 mL规格的无菌离心管中，6000 r/謝鐘min离心5 min，弃上清，50 μL无菌超纯水男店悬浮洗涤沉淀1-2次，6000 r/min离心5多用 min，完-全去除上清；
   &n用樹bsp;  &就我nbsp;  b) 加入30 μL裂解液，充分悬浮菌從鐵体，轻弹管壁消除气泡，99℃加热10 min；
   暗外    妹也  c) 120醫聽00 r/min离心15 mi她車n，上清即为粗提的DNA，可转移至0.2 mL无菌离心管中，在-20℃廠弟下可長(cháng)期保存。

   B. 可疑菌落模板 DNA 的制备費訊：挑取可疑菌落，悬浮到(dào)含30 μL裂解液的无菌离心管中，錯子後(hòu)按照上述步骤b)、c匠下)操作。

2，阴、阳性對(duì)照和干粉试剂复溶

   A. 阴飛聽、阳性對(duì)照复溶：首-次使用時(shí)，加入8月什0 μL超纯水至阳性對(duì)照和阴性對(duì)照冻干金放粉中，待溶解後(hòu)混匀，-20℃存储待用。
   B. 干粉试剂复溶：取出冻的書干粉试剂，按照需求剪取n个检测试剂管（n=待检测樣(yàng)品我綠数+1管阳性對(duì)照+1管阴計跳性對(duì)照），每管加入20 μL复溶液身務，完-全溶解後(hòu)待用。

3，扩增反应
  &nbs光綠p;A. 打開(kāi)能(néng)够提供恒温条件的仪器，设置到友從(dào)64℃待用；
   B藍他. 向(xiàng)上述已加入复溶液的n个反应管中各加入显色指示剂2.5說做 μL；
   C.理我 向(xiàng)上述已加入复溶液的n个反应知房管中分别加入待测樣(yàng)品核酸、船放阴性對(duì)照、阳性對(d間內uì)照各2.5 μL，盖紧盖子；
   D. 將(jiāng)所有的反应管置于恒温船開仪器中，恒温64℃反应50 min。

4，结果判读：反应结束後(hòu)，建议在自然光线充足的环境条件下，將(jiāng)樣(短能yàng)品置于白色背景下观察结果，阴性對(d兒讀uì)照检测试剂管呈淡橙色，阳性對(duì)照检测试剂管到她呈荧光绿，待测樣(yàng)品反应管以此作为對(du聽制ì)照進(jìn)行判读，若阴阳對(duì)照反应管任一结果与上述情况不從媽符，则本次检测结果无效，应重新检测或与产品技术支持联系。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒灵敏度對(duì)比

粪链球菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于包装饮用水等水体中粪链球菌的在謝快速检测

粪链球菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于包装饮用水等水体中粪链球菌的快唱們速检测