小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速检测试剂盒

产品名称：小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速检测试剂盒
英文名称：Rapid Detection kit站數 for Yersinia enterocolitica

产品编号与包装规格：

产品简介：本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术（Loop-medi飛作ated isothermal amplification，LAMP），用于食風頻品中小肠结肠耶尔森氏菌的快速检靜森测，可借助显色指示剂直接判读结一現果。

检测原理：利用兩(liǎng)對(duì)特殊引物和具有链置换活性的Bst DNA聚身些合酶，使模板兩(liǎng)端可街引物结合处循环出现环状单链结构，引物顺利与模板结合并進(jìn)行链置短司换扩增反应，实现在恒温条件下（60-65℃）進(jìn)行白海连续快速扩增。反应加入显色指示剂，阴阳性结果显色差南門异显著，可直接通過(guò)颜色变化判读结果。

产品特点：
  &nb章老sp;  &n秒也bsp;1. 快速简便：將(jiāng)酶、引物等反志暗应组分混匀後(hòu)進(jìn)行干粉化处理，增加機路试剂稳定性，使用時(shí)减少溶液配制步骤，工草更为便捷，整个检测反应可在1 h内完成(ch光暗éng)；
   喝費   2. 特异性高：利用靶基因序列上的多个独務舊立区域设计多条引物，保证扩增反应的高度特异性；
    &白知nbsp; 3. 灵綠銀敏度高：最-低检验限达到(dào)18 CFU/Test；
    影也  4. 判读简单能票：反应前加入显色指示剂，反应後(hòu)畫白通過(guò)肉眼观察反应液颜色变化或者經(jīng)荧光监現銀测仪器跟踪荧光图谱的变化判读结果，直观方便，報風且可有效避免反应後(hòu)開農街(kāi)盖造成(chéng)的气溶胶污染。

小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速检测试剂盒产品组分：

储存条件与保质期：2~8℃条件下储存，有效期为12个月。

适用仪器：
     時著; 1. PCR仪器或金属浴恒温器，如果检测樣(yàn我秒g)品为DNA樣(yàng)品，水浴锅即可。
  &nb房自sp;   2. 高們鄉速离心机，樣(yàng)品的前处理需要用高速离心机做分离。

樣(yàng)品富集：
   &nbs路木p;  1業現. 樣(yàng)品前处理：取25 g待检樣(時唱yàng)品置于225 mL 改良磷酸盐缓冲液（PSB）中月用，前增菌10-12 h，對(d如我uì)增菌液中的菌体富集用于LAM男員P快速检测。
    可讀  2. 适用樣(yàng)品类型：增菌液或者可疑菌媽器落樣(yàng)品。
     &nbs跳土p;3. 待测樣(yàng)品存放：書線粗提的待检DNA樣(yàng)品保存于-4~0℃，不应该超過(guò路如)24 h；利用试剂盒提取的DNA樣(yàng)品可在-2讀男0℃長(cháng)期保存，但应避免反复冻融。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒操作流程

小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速检测试剂盒使用指南：

1，樣(yàng)品前处理

   A森得. 樣(yàng)品增菌液模板DNA的制备：
     但城;    見樂a) 吸增菌液1 mL到(dà內家o)1.5 mL规格的无菌离心管中，6000 r/min离心5 min，弃上來上清，50 μL无菌超纯水悬浮洗涤沉淀1-2次，60著月00 r/min离心5 min，完-全去除上清；
   &n弟樹bsp;   &nbs愛技p; b) 加入30 μL裂解液愛空，充分悬浮菌体，轻弹管壁消除气泡，99℃加热10 min；
   可河     &nb身中sp;c) 12000 r/min离心15 min，上清即为粗提的DNA新畫，可转移至0.2 mL无菌离心管中，在-20℃下新村可長(cháng)期保存。

   B門船. 可疑菌落模板 DNA 的制备：挑取可疑菌落，悬浮到(dào)含30 μ地道L裂解液的无菌离心管中，後(hòu說小)按照上述步骤b)、c)操作。

2，阴、阳性對(duì)照和干粉试剂复溶

   A. 阴、阳性對(duì)照复溶：首-跳照次使用時(shí)，加入80 μL超纯水至阳性對(可刀duì)照和阴性對(duì)照冻干粉中，待溶解後(hòu)混車飛匀，-20℃存储待用。
   B. 干粉试剂复熱河溶：取出冻干粉试剂，按照需求剪取n个检测试剂管（n=待检测樣(yàng)品数離麗+1管阳性對(duì)照+1管阴性對(duì)照），每我書管加入20 μL复溶液，完-全溶解後(hòu)待用。

3，扩增反应
   A. 打水厭開(kāi)能(néng)够提供恒温条件的仪器，设置到(dào)61℃待用；章高
   B. 向(x有秒iàng)上述已加入复溶液的n个反应管中各加入显色指示唱黃剂2.5 μL；
   C. 向(xiàng)上述已加入复溶遠筆液的n个反应管中分别加入待测樣(yàng)品核酸、阴麗費性對(duì)照、阳性對(duì)照各2.5 μL，盖紧盖子；
   D. 有家將(jiāng)所有的反应管置于恒温仪器中，恒温61℃反应50 m友笑in。

4，结果判读：反应结束後(hòu)，建议在自然光线充足的环境離在条件下，將(jiāng)樣(yàng)品置于白色背景下观察结果，阴性對(小近duì)照检测试剂管呈淡橙色，阳性對(duì)照检测试剂管呈不答荧光绿，待测樣(yàng)品反应管以此作为對(duì綠又)照進(jìn)行判读，若阴阳對(duì)對討照反应管任一结果与上述情况不符，则本次检测结果无拿化效，应重新检测或与产品技术支持联系。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒灵敏度男藍對(duì)比

小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于食品中小肠结肠耶尔森氏菌的快速检测，可北森借助显色指示剂直接判读结果。

小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于食品中小肠结肠耶尔森氏菌的快速检對的测，可借助显色指示剂直接判读结果。