产品名称:Bst DNA Polymerase,得作 Large Fragment
中文名称:Bst DNA聚合酶,大片段
产品编号与包装规格:
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
HKE015-02A | Bst DNA Polymerase, Large Fragment | 800U | Bst DNA聚合酶,大片段 |
产品描述:Bst DNA聚合酶大片段是Bacillus stearothermo亮是philus DNA聚合酶的一部分,来源于E.coli菌株。利用基因歌個重组技术,在大肠杆菌中進(jìn)行表达後(hòu)經(jīn錯子g)多次纯化分离而得。该酶具有5′→3′DNA聚合酶活性, 但信南不具有5′→3′外切核酸酶活性。本制品可应用于DNA测序、DNA鄉風 标记和等温DNA扩增等。
产品特点:
&n些體bsp; 链置换活性强從日。
&nbs制說p; 高灵敏度。
&nbs訊妹p; 樶佳活性温度为 65℃,多街恒温扩增,无需热循环仪。
产品用途:
 員下;1)富含 GC 序列的 DNA 序列测定;海時
2)雜懂微量(纳克量)DNA 模板的快速测子爸序;
&nbs區河p; 3)我鄉随机引物 DNA 标记;
議那 4)双链 DNA 5'你生突出端补平法标记;
一話5)可用于等温 DNA 扩增,如环介导等温扩增(LAMP),全知生基因组扩增(WGA),解旋酶恒温基因扩增(H火老DA)等。
应用实例:图例)Bst DNA 聚合酶大片段用于LAMP 实验,以廠吧 M13 ssDNA 为模板, 以 F3/B3時現,FIP/BIP 为引物,65數他℃反应1 小時(shí)後(h河哥òu),進(jìn)行琼脂糖凝胶电泳检测。
泳道(dào)M:1kb DNA Ladder ;
泳道(dào) 1:LAMP 扩增产物。
反应体系(25μL)如下:
10×Bst LF Buffer | 2.5μL |
F3/B3 | 0.2μM(终浓度) |
FIP/BIP | 0.8μM(终浓度) |
甜菜碱 | 1M(终浓度) |
dNTPs | 400μM(终浓度) |
M13 ssDNA 模板 | 2μL |
Bst DNA 聚合酶Large Fragment | 1μL(8U) |
ddH2O | 至 25μL |
保存温度:-20℃。
产品包装(A 包装):
质量保证:經(jīng)多次柱纯化,SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的關通条带,qPCR 方法检测无大肠杆菌 DNA 残留,无核酸内、外切酶一照污染。
活性定义:65℃条件下,30分钟内使10nmol的dNT外長Ps掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
10×反应缓冲夜:200mM Tris-HCl,100mM (NH4)2SO4,500mM KC愛暗l,20mM MgSO4,1% Tween 20,pH制訊8.8。
保存体系:50 mM KCl,10 mM Tris-HCl鄉個 (pH 7.5),1mM DT畫近T, 0.1 mM EDTA,0.1% Trit答制on X-100 和 50% Gly1ce得些rol。
反应条件:1×反应缓冲夜,65℃温浴。
热失活:80℃,10 分钟。
注意事(shì)项:
 學唱; 1)Bst DNA 聚合酶不具有的師 3′→5′外切酶活性;
&n技科bsp; 2)長(cháng)期贮存需加入 10舞音0μg/mL BSA 或 0.1% Triton X-1長報00;
&nbs那機p; 3)建议反应温度不要超過(guò)熱小 70℃;
&nbs坐信p; 4)Bst DNA 聚書腦合酶不能(néng)用于热循环测間關序或PCR。