产品名称:Bst DNA Polymerase, Large得道 Fragment
中文名称:Bst DNA聚合酶,大片段
产品编号与包装规格:
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
HKE015-02B | Bst DNA Polymerase, Large Fragment | 800U×5 | Bst DNA聚合酶,大片段 | &nb金子sp;  歌家; |
产品描述:Bst DNA聚合酶大片段是Bacillus stearoth煙嗎ermophilus DNA聚合酶的一部分,来源于E.co雜慢li菌株。利用基因重组技术,在大肠杆菌中進(jìn)行表达後(hò弟如u)經(jīng)多次纯化分离而得。该務喝酶具有5′→3′DNA聚合酶活性, 但不具有5′→錢藍3′外切核酸酶活性。本制品可应用于DNA测序、DNA 标舊朋记和等温DNA扩增等。
产品特点:
&n要如bsp;链置换活性强。
雨到 高灵敏度。
樶佳活明窗性温度为 65℃,恒温扩增,无需热循环仪。
产品用途:
&nbs又好p;1)富含 GC 序列的 DNA 序列测定弟雨;
 舊吃; 2)微量(纳克量)DNA 模板的快速测序;
&nb得唱sp;  區少;3)随机引物 DNA 标记;
&n玩樂bsp; 4)双链 DN妹還A 5'突出端补平法标记;
&吧舊nbsp; 5低到)可用于等温 DNA 扩增,如环介导等温扩體美增(LAMP),全基因组扩增(WGA),解旋酶恒温基因扩增(數都HDA)等。
应用实例:图例)Bst DNA 聚合酶大片段用于LAMP友男 实验,以 M13 ssDNA 線靜为模板, 以 F3/B3,FIP/BIP 为引物,65℃反应1 小時(s拿要hí)後(hòu),進(jìn)行琼脂糖凝胶电泳检测。
泳道(dà可視o)M:1kb DNA Ladder ;
泳道(dào) 1:LAMP 扩增产物。
反应体系(25μL)如下:
&nbs裡暗p; 機用 10×Bst LF Buffer |  光制; &nbs花市p; 2.5μL |
&n裡業bsp; F3/B3地訊 | &nb跳司sp; 都技 0.2μM(终浓度) |
&nbs不為p; FIP/BIP | &看但nbsp; 國懂 0.8μM(终浓度) |
&n務新bsp; &nbs她行p; &音業nbsp; 甜菜碱 | 可內 1M(终浓度) |
秒妹 &nbs文的p; dNTPs | &土筆nbsp; 木那 400μM(终浓度) |
&nb女有sp; 湖木 M金白13 ssDNA 模板 | &nbs業筆p; 2μL |
愛學 &n歌離bsp; Bst DNA 聚合酶Large Fragment | &nb什照sp; &n報的bsp; 1μL(不鄉8U) |
家線 &機黑nbsp; ddH2O | &n筆姐bsp; 慢能至 25μL |
保存温度:-20℃。
产品包装(A 包装):
质量保证:經(jīng)多次柱纯化,SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的業花条带,qPCR 方法检测无大肠杆菌 DNA 残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:65℃条件下,30分钟内使10nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶在紙量定义为1个活性单位。
10×反应缓冲夜:200mM Tris-HCl,100mM (NH4)2SO4我計,500mM KCl,20mM MgSO4,1% Tween 20,木謝pH8.8。
保存体系:50 mM KCl,10 mM Tris-HCl (pH 7.5動玩),1mM DTT, 0.1 mM EDTA,0.1%女飛 Triton X-100 和 50% Gly1cerol。
反应条件:1×反应缓冲夜,65℃温浴。
热失活:80℃,10 分钟。
注意事(shì)项:
&nbs對藍p; 1)Bst DNA 聚合日人酶不具有 3′→5′外切酶活性;
&nb中志sp;2)長(cháng)期贮存需加入 100μg/mL B計志SA 或 0.1% Triton X書日-100;
&nbs兵筆p;3)建议反应温度不要超過(guò) 70℃;
事看 &nb討計sp;4)Bst DNA 聚合酶不能(néng)用于热循环测序或PCR。