产品名称:Fast Pfu DNA Polymerase行厭(with dNTP)
中文名称:快速Pfu DNA聚合酶(with dNTP)
产品编号与包装规格:
编号 朋會 | 产品名称 &nb家動sp; &nbs金什p; | 规格  答妹; 視樂 | 产品介绍 亮讀 | 产品价格  制吃; |
&愛嗎nbsp; &n問志bsp;HKE031-01B | &nb上工sp; Fast Pfu DNA 森街Polymerase(with dNTP) | &如女nbsp; 長為 250U×5 | &n線北bsp; &nb銀問sp;快速Pfu DNA聚合酶 | 是舊 &nb和內sp;2398 |
产品描述:本制品是通過(guò)采用分子進(jìn)化技术對(duì)普通Pfu草睡梅進(jìn)行改造而获得的 新型Fast Pfu窗理梅,是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶解决了高保真PCR反应理草中Pfu梅扩增灵敏度低、延伸速度缓慢的难题,能(néng)够高效雪線、快速扩增≤6kb片段目的基因片段(樶長(cháng)可达20kb),農離模板低至0.05ng, 并且在DNA末端补平北間、全基因合成(chéng)、引入突变等之中有著(zhe)很好(hǎ城個o)的应用。
产品特点:
哥身 制也高保真:保真度高于Pfu梅,为普通Taq酶的街謝50倍。
麗那 快速高效:F舊樹ast Pfu扩增速度为普通Pf女近u梅的数倍,72℃保温30秒可謝廠延伸1kb以上。扩增長(chá高什ng)度可达20kb,能(néng)高效扩增≤6kb片段。
 市章; 高灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模站電板中扩增出1.2kb特定基因片段,扩增性能筆笑(néng)显著优于普通Pfu梅。
&nbs朋離p; *配方的 5×Buffer:使PC匠中R 扩增反应更加稳定、灵敏、高效。
产品用途:用于要求保真度比较高的PCR反应,包括克龙PCR、到雜DNA片段拼接、引入突变、全基因合成(樹術chéng)、DNA末端补平等,也用于复杂模板, 高GC/AT 南一模板的扩增。
使用建议:(Fast Pfu DNA聚合酶产生的海了PCR产物为平末端,无3′端"A"突出, 除使用环凯PCR一步定向玩服(xiàng)克龙试剂盒(Cat. No: HKNR001)外, 其它PCR樂年 产物的克龙方案有:)
&nb鐵妹sp; 1)PCR前引物進(jìn)行5′端加磷修饰或將(jiān暗哥g)PCR产物麟酸化处理後(hòu)再直接克龙于平末端的载体低現中。
筆雪 2)將(ji腦機āng)产物3′末端加A後(hòu)再子黑与T载体连接。
 黑很; 3)由于Fast Pfu自道 DNA聚合酶的校對(duì)活性可引起(qǐ)引物从3′端被(bèi)部分話算降解。因此在设计引物時(shí)应适当增加引物的長(chán湖票g)度,理想的引物長(cháng)度为20~30mer可錯s。另外为了减少由3′→5′外切酶活性引起(qǐ)的引物降解輛物,尽量在冰上配制反应体系,并樶後(hòu)加入綠雜Fast Pfu DNA聚合酶。
应用实例:图例一)50μL 扩增体系中,λDNA姐鄉 为模板,扩增 1kb~20kb 片段。
泳道(dào)微冷 M:λ/Hind III DNA Marker; 村東;
泳道(dào) 1:1kb;
泳道(dào) 2:2kb;
泳道(dào) 3:4kb;
泳道(dào) 4:6kb;
泳道(dào) 5:8kb;
泳道(dào) 6:10kb;&n多大bsp;
泳道(dào)7:12kb;
泳道(dào) 8:20kb
保存温度:-20℃。
产品包装(A 包装):
活性定义:在74℃条件下,30 分钟内催化 10nmol dNTPs 掺入反应成(議唱chéng)为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。。
常用反应体系(50μL):
常用PCR 循环:
注意事(shì)项:
 媽秒;1)對(duì)高 GC 含量模板,建议將(jiāng)变性温度提高她喝到(dào) 98℃。
&nb作服sp;2)對(duì)于高 GC 模板,建议配套使用 PC月吃R 增强剂 I(Cat. No: H紙小KE050)和 PCR 增强剂 II(Cat舞花. No: HKE051),或者添加终紙數浓度为 5%-8% DMSO。