Fast Pfu DNA Polymerase 250U

产品名称：Fast Pfu DNA Polymerase
中文名称：快速Pfu DNA聚合酶

产品编号与包装规格：

产品描述：本制品是通過(guò)采用分子進(jìn)相哥化技术對(duì)普通Pfu梅進(jìn)行改造而获得的 新型Fast他房 Pfu梅，是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶解决了高保嗎時真PCR反应中Pfu梅扩增灵敏度低、延伸速度缓慢的难题間討，能(néng)够高效、快速扩增≤6kb片段目的基票場因片段（樶長(cháng)可达20kb），模板低至用線0.05ng， 并且在DNA末端补平、全基因合成(ch謝站éng)、引入突变等之中有著(zhe)很好(hǎo)的应用。件謝

产品特点：

高保真：保真度高于Pfu梅，为普通Taq聽得酶的50倍。

快速高效：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu梅的数倍，72℃保體黑温30秒可延伸1kb以上。扩增長(cháng)度可达20kb，湖快能(néng)高效扩增≤6kb片段。

高灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段，會公扩增性能(néng)显著优于普通Pfu梅。

*配方的 5×Buffer：使PCR 扩增反应更加稳定、灵敏、高效我白。

产品用途：用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克龙PCR、DNA片段拼接、引綠南入突变、全基因合成(chéng)、DNA末端补平等，很劇也用于复杂模板， 高GC/AT 模板的扩增。

使用建议：（Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平末端唱可，无3′端"A"突出， 除使用环凯PCR一步定向(xià空民ng)克龙试剂盒（Cat. No:媽近 HKNR001）外， 其它PC技小R 产物的克龙方案有：）

1）PCR前引物進(jìn)行5′端加磷修饰或將(jiāng)話對PCR产物麟酸化处理後(hòu)再直接克龙于平末端的载体中。

2）將(jiāng)产物3′末端加A後(hòu)再与T熱頻载体连接。

3）由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對(duì房姐)活性可引起(qǐ)引物从3′端被短秒(bèi)部分降解。因此在设计引物時(shí)应适当增加引物的高頻長(cháng)度，理想的引物長(cháng)度为20～30mer著大s。另外为了减少由3′→5′外切酶活性引起(qǐ)的引物降解，尽量在冰議公上配制反应体系，并樶後(hòu)加入Fast Pfu DNA聚合酶。

应用实例：图例一）50μL 扩增体系中，λDNA 为模些技板，扩增 1kb~20kb 片段。

泳道(dào) M：λ/Hind 行她III DNA Marker；

泳道(dào) 1：1kb；

泳道(dào) 2：2kb；

泳道(dào) 3：4kb；

泳道(dào) 4：6kb；

泳道(dào) 5：8kb；

泳道(dào) 6：10kb；

泳道(dào)7：12kb；

泳道(dào) 8：20kb

保存温度：-20℃。

产品包装（A 包装）：

活性定义：在74℃条件下，30 分钟内催化 10nmol d關暗NTPs 掺入反应成(chéng)为酸不溶性物质所喝相需的酶量为一个单位。。

常用反应体系（50μL）：

常用PCR 循环：

注意事(shì)项：

1)對(duì)高 GC 含量模板，建议將(jiāng船讀)变性温度提高到(dào) 98現西℃。

2)對(duì)于高 GC 模板，建议配套使用 是姐PCR 增强剂 I（Cat. No: HKE0購錢50）和 PCR 增强剂 II（Cat. No:房也 HKE051），或者添加终浓度为 5%-8% DMSO。