产品名称:Fast Pfu DNA Polymerase
中文名称:快速Pfu DNA聚合酶
产品编号与包装规格:
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
&n匠南bsp; &nb作低sp;HKE031-02B | 相件 F請問ast Pfu DNA Polymerase | &nbs開紅p; &nb文物sp;250U×5 | &nb開綠sp; &n自什bsp;快速Pfu DNA聚合酶 |  他小; 2162 |
产品描述:本制品是通過(guò)采用分子進(jìn)化技术對(duì)普通Pfu梅進(中家jìn)行改造而获得的 新型F西的ast Pfu梅,是新一代的高保真D藍們NA聚合酶。该酶解决了高保真PCR反应中Pfu梅和高扩增灵敏度低、延伸速度缓慢的难题,能(néng)够高效、快速扩增視媽≤6kb片段目的基因片段(樶長(cháng)可达飛就20kb),模板低至0.05n筆年g, 并且在DNA末端补平、全基因合成(ch北制éng)、引入突变等之中有著(zhe)很好(hǎo)的应用。
产品特点:
高保真木低:保真度高于Pfu梅,为普通Taq酶的50倍。
快你東速高效:Fast Pfu扩增速度为普通Pfu梅的数倍,72她好℃保温30秒可延伸1kb以上。樂那扩增長(cháng)度可达20kb,能(nén有就g)高效扩增≤6kb片段。
&nb地海sp; 高灵敏:可从0.05ng件多人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基吃間因片段,扩增性能(néng)显著优于普海上通Pfu梅。
&nbs靜又p; &nbs得金p;*配方的 5×Buffer:使PCR 扩增反应更加稳定、灵敏、歌南高效。
产品用途:用于要求保真度比较高的PCR反应,包紙高括克龙PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合西一成(chéng)、DNA末端补平等,也用于复杂模板, 高GC/電兒AT 模板的扩增。
使用建议:(Fast Pfu DNA聚合酶产生些裡的PCR产物为平末端,无3′端"A"突出, 除間開使用环凯PCR一步定向(xiàng)克龙试剂盒(Cat. No: H習玩KNR001)外, 其它PCR 产笑街物的克龙方案有:)
男視 1)PCR前引物進(jìn)農答行5′端加磷修饰或將(jiāng)PC個空R产物麟酸化处理後(hòu)再直接克龙于平末端的载体中。
科制 2)將(jiāng)产物3′末端加A後(hòu)再畫慢与T载体连接。
3輛水)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對(d南答uì)活性可引起(qǐ)引物从3′端被(bèi)部分降解。輛報因此在设计引物時(shí)应适当增暗微加引物的長(cháng)度,理多城想的引物長(cháng)度为20~30mers。又暗另外为了减少由3′→5′外切酶活性引起(qǐ)的引物降解,尽量在冰歌笑上配制反应体系,并樶後(hòu)加入Fast Pf村議u DNA聚合酶。
应用实例:图例一)50μL 扩增体系中,λDNA 为模板,笑化扩增 1kb~20kb 片段。
泳道(dào) M:λ/Hind III月機 DNA Marker;
泳道(dào) 1:1kb;
泳道(dào) 2:2kb;
泳道(dào) 3:4kb;
泳道(dào) 4:6kb;
泳道(dào) 5:8kb;
泳道(dào) 6:10kb;
泳道(dào)7:12kb;
泳道(dào) 8:20kb
保存温度:-20℃。
产品包装(A 包装):
活性定义:在74℃条件下,30 分钟内催化 10nmol dNTPs 白票掺入反应成(chéng)为酸不溶性物质所城得需的酶量为一个单位。。
常用反应体系(50μL):
常用PCR 循环:
注意事(shì)项:
&校錢nbsp;1)對(duì)高 GC 含量模板,建议將(jiāng)变性温度提嗎身高到(dào) 98℃。
 市答; 2)對(duì)于高 GC 模板聽可,建议配套使用 PCR 增强剂 I(Cat.照國 No: HKE050)和 PCR訊作 增强剂 II(Cat. No: HKE05船有1),或者添加终浓度为 5%-8% DMSO。