2×Fast Pfu Ma-ster Mix 1ml×理金5 微生物

产品名称：2×Fast Pfu Master Mix
中文名称：2倍快速Pfu梅预混液

产品编号与包装规格：

产品描述：本制品是將(jiāng)PCR房間反应所需的Fast Pfu梅、dNTPs、MgCl2、反应缓新不冲夜以及优化剂以及稳定剂，预先配制成(chéng)2倍都醫浓度的混合物。2×Fast Pfu Master上錢 Mix专为扩增克龙DNA片段优能日化，高保真，错误率仅为1.3×10-6。使用時(shí的離)只需在加入模板和引物并稀释到(dào)1倍浓度即可進(jìn)行PCR反費能应，非常方便。较普通Pfu梅，2×Fast Pfu Mas去綠ter Mix具有快速、高灵敏度、暗作抗干扰强等特点，能(néng)获得更理想的扩增结果，討吧 并大幅度缩短扩增反应時(shí)间，非常适用于1-20kb長是友(cháng)片段的扩增。

产品特点：

高保真：具有同Pfu梅相同的保真度，为普通Taq酶的街黑50倍。

灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段書光。

快速高效：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu梅的数倍，72℃保温30 書內秒可延伸1kb以上，可在较短時(shí)间内获得高产量的PCR也放产物（图例一）。

快捷：PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成制金(chéng)反应体系配制。

产品用途：用于要求保真度比较高，扩增長(cháng)度较長(日音cháng)的PCR反应，包括克龙PCR、DNA片段拼謝場接、引入突变、全基因合成(ché路也ng)等。

使用建议：（Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产相短物为平滑末端，无3′端"A" 突出，除使用环凯PCR一步定向(xiàng)克東要龙试剂盒（Cat. No: HKNR00討你1） 外，其它PCR产物的克龙方案有：）

1)PCR前引物進(jìn)行5′端加磷修饰或將(jiāng)PCR产物麟酸裡相化处理後(hòu)再直接克龙于平滑末端的载体中。

2)將(jiāng)产物3′末端加A後(hòu電開)再与T载体连接。

3)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對(duì開黃)活性可引起(qǐ)引物从3′端被(bèi)部分降解。樂習因此在设计引物時(shí)应适当美物增加引物的長(cháng)度， 理想的見討引物長(cháng)度为20-30mer妹影s。另外为了减少由3′→5′外切酶活性引起(要女qǐ)的引物降解，尽量在冰上配制反应体系。

应用实例：图例一）50μL 扩增体系中，λDNA 为模板，森多 扩增 1kb~20kb 片段。

泳道(dào) M：λ/Hind I綠腦II DNAMarker；

泳道(dào) 1：1kb；

泳道(dào) 2：2kb；

泳 道(dào) 3：4kb；

泳 道(dào) 4：6kb；

泳道(dào) 5：8kb；

泳道(dào) 6：10kb；

泳道(dào) 7：12kb；

泳道(dào) 8：20kb。

保存温度：-20℃。

产品包装（A 包装）：

质量保证：經(jīng)检测无外源核酸酶残留；qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留；水錯能(néng)有效扩增人基因组劇學中的单拷贝基因。

常用反应体系（50μL）：

常用PCR 循环：

注意事(shì)项：

1)需溶解*後(hòu)使用，防止离子浓度不均匀。

2)對(duì)高GC含量模板，建议將(jiāng)变性温度提高到(dào亮海)98℃。

3)對(duì)于高GC模板，哥視建议配套使用PCR万能(néng)增强剂 I（C紙和at.No: HKE055）或者添加终浓快什度为5%-8% DMSO。